Expansão do cumulus oophorus de oócitos bovinos maturados in vitro na presença...

Estudos de lipidômica de oócitos e embriões destacaram recentemente a importância dos lipídios como moléculas sinalizadoras e constituintes das membranas biológicas e seu potencial impacto nas biotécnicas aplicadas à reprodução. O objetivo geral deste trabalho foi avaliar a influência de duas classes de lipídios, um fosfolipídio e um ácido graxo, na maturação in vitro do complexo cumulus-oócito, mais especificamente no processo de expansão do cumulus oophorus, visando à transferência de tecnologia para a Reprodução Assistida Humana. Foram usados oócitos bovinos como modelo experimental. Os complexos cumulus-oócito (CCOs) foram aspirados de folículos medindo de 3 a 8 mm de ovários obtidos em abatedouro e maturados em meio TCM-199 suplementado com 10% de soro, 5 μg/mL FSH, 0.5 μg/mL LH, com ou sem a adição de ácido linoleico (LA) ou fosfatidilcolina (PC), durante 22h a 38,5 °C em atmosfera úmida de 5% de CO2. Os CCOs foram cultivados na densidade de 1 CCO/10 μL de meio e avaliados quanto ao grau de expansão do cumulus oophorus imediatamente antes e após a MIV. Cada CCO foi microfotografado e o maior e menor diâmetro do cumulus oophorus foi medido com auxílio de uma régua micrométrica calibrada usando zoom 5x e o software AxioVision (Zeiss). O aumento do diâmetro do cumulus foi analisado pelo modelo de regressão linear de efeitos mistos através do software SAS 9.0, utilizando a PROC MIXED. O nível de significância adotado foi de 5%. O presente estudo mostrou que não houve redução no diâmetro de cumulus oophorus de oócitos maturados in vitro em meio suplementado com LA a 200 μM ou PC a 100 μM, em comparação com os diâmetros pós-MIV dos CCOs controles. Avaliações subsequentes serão instituídas para ampliar o número amostral e correlacionar estes achados com a expressão de genes reguladores da maturação terminal do CCO e expansão do cumulus oophorus

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Data de Publicação

2014-04-25

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