Análise do efeito do silenciamento gênico de SH3-domain kinase binding protein possivelmente...

Determinadas espécies, quando expostas a um ciclo de dessecação extrema e reidratação, têm capacidade de se manter viáveis e se reproduzir. Esses organismos alcançam um estado de animação suspensa com organização biológica estável, denominado anidrobiose (do grego, “vida sem água”). Recentes estudos visam compreender e caracterizar melhor as vias do processo de anidrobiose, com o intuito de aplicar tal mecanismo na conservação de materiais biológicos, como vacinas, células e tecidos. Neste trabalho o nematóide anidrobioto Panagrolaimus superbus foi escolhido como modelo, devido a sua semelhança biológica com o já bastante estudado e conhecido Caenorhabtidis elegans. Dentre as inúmeras classes de proteínas existentes na recém-criada biblioteca de cDNA deste nematóide, foi escolhido um cDNA denominado “SH3-domain kinase binding protein”, pertencente à grande família de proteínas quinases, como alvo de estudo. As proteínas quinases são elementos importantes na comunicação do controle intracelular de eucariotos e, portanto, boas candidatas à regulação das respostas celulares sob estresse hídrico. Por meio da técnica de RNAi via imersão foi possível validar a participação desta proteína na via de anidrobiose, uma vez que seu silenciamento provoca uma diminuição significativa da viabilidade após submissão dos espécimes ao estresse hídrico. Entretanto, efeitos pleiotrópicos na morfologia, comportamento e desenvolvimento não foram observados. Paralelamente dois experimentos visando análises futuras via RNAi em larga escala foram realizados. O primeiro almejava substituir o substrato de fixação dos vermes no procedimento de dessecação; verificou-se que a placa multipoços “Protein LoBind” se mostrou eficaz para isto. O segundo objetivava avaliar o ensaio de MTT como um método rápido de determinação da viabilidade dos vermes, o que se revelou promisor

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Data de Publicação

2014-04-28

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