Trabalho de Conclusão de Curso
Documento
Autoria
Unidade da USP
Data de Apresentação
Orientador
Banca
Goldman, Maria Helena de Souza (Presidente)
Strini, Edward José
Simoes, Zila Luz Paulino
Título em Português
Proteínas parceiras de interação de NtCDKG;2 indicam sua atuação no metabolismo de RNA, na sinalização por auxina e na regulação do florescimento
Palavras-chave em Português
SCI1
CDK
Estigma
Estilete
Desenvolvimento do pistilo
Duplo-híbrido em leveduras
Resumo em Português
O estudo de genes com expressão preferencial ou exclusiva nos órgãos florais é importante para compreender o desenvolvimento dessas estruturas e, assim, ampliar o conhecimento sobre a biologia reprodutiva das plantas. Um desses genes, SCI1 (Stigma/style Cell-cycle Inhibitor 1) é preferencialmente expresso no estigma e estilete, e atua na regulação negativa da proliferação celular). Em uma varredura em busca de proteínas parceiras de interação com SCI1, identificou-se, entre outras proteínas, uma CDK (Cyclin Dependent Kinase) – denominada NtCDKG;2. Com o intuito de elucidar a função dessa proteína, foi dado início a um screening de uma biblioteca de cDNAs de estigma e estilete, no sistema de duplo-híbrido em leveduras, utilizando NtCDKG;2 como isca. O objetivo desse trabalho foi identificar os candidatos encontrados no screening e confirmar as interações par-a par, para formular hipóteses sobre a(s) função(ões) biológica(s) de NtCDKG;2, a serem testadas experimentalmente no futuro. Foram confirmadas por re-teste par-a-par em Y2H as interações de NtCDKG;2 com: NtTCP15, NtDNAJ3 e NtMBD10, proteínas com putativo envolvimento na regulação do florescimento; NtRSZ21 e NtCDKF;1, que atuam no processamento de RNA, e NtTIR1 e NtIAA17, as quais fazem parte de vias de transdução de sinal de auxina. Além disso, a interação de NtCDKF;1 e NtCDKG;2 foi confirmada através de ensaio quantitativo da ?-galactosidase, utilizando ONPG como substrato. Em conjunto, esses resultados fortalecem a hipótese na qual NtCDKG;2 atua no metabolismo de RNA e em vias de sinalização de auxina e de regulação do florescimento
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Data de Publicação
2017-02-17
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