Trabalho de Conclusão de Curso

Documento

Autoria

Adolpho, Letícia Faustino

Unidade da USP

Data de Apresentação

Orientador

Beloti, Márcio Mateus

Título em Português

Efeito da superfície de titânio com nanotopografia sobre a expressão temporal de rad GTPase e proteína Gla da matriz em células osteoblásticas

Palavras-chave em Português

Osso
Osteoblasto
Nanotopografia
Rad GTPase
Titânio

Resumo em Português

Superfícies de titânio (Ti) com nanotopografia podem favorecer a diferenciação osteoblástica por modularem a síntese de fatores locais que atuam sobre diferentes vias de sinalização que regulam a formação óssea. Resultados do nosso grupo de pesquisa evidenciaram que o potencial osteogênico da nanotopografia, obtida por condicionamento com solução de H2SO4/H2O2, envolve a modulação de, ao menos, dois mecanismos intracelulares regulados por BMPs e Integrinas. Estudos recentes identificaram a expressão e a participação de proteínas denominadas Rad GTPase (Rad, do inglês, Ras-related associated with diabetes) e Proteína Gla da Matriz (MGP, do inglês, Matrix Gla Protein) no processo de diferenciação osteoblástica e na modulação da homeostasia óssea. Considerando a relevância de ambas para a osteogênese, nossa hipótese é que o potencial osteogênico da superfície de titânio com nanotopografia se deve, ao menos em parte, à sua capacidade de modular a expressão de Rad e Mgp. Assim, o objetivo desse estudo é avaliar o efeito da superfície de titânio com nanotopografia, comparada à superfície de titânio usinada, sobre a expressão temporal de Rad e Mgp em células osteoblásticas. Para testar nossa hipótese, células da linhagem MC3T3-E1, subclone 14, foram cultivadas sobre discos de titânio com nanotopografia (Ti- Nano) e discos de titânio usinado (Ti-Controle) e as repostas celulares foram avaliadas por até 14 dias. Aos 3, 5, 7, 10 e 14 dias, foi avaliada a expressão dos genes marcadores osteoblásticos, fosfatase alcalina (Alp), fator de transcrição relacionado ao runt 2 (Runx2), osterix (Osx), osteocalcina (Oc), osteopontina (Opn) e sialoproteína óssea (Bsp), além dos genes Rad e Mgp por PCR em tempo real. Aos 10 dias, a atividade in situ de ALP foi também avaliada qualitativamente pelo método Fast Red. Os dados foram comparados pelo teste ANOVA (p≤0,05). Os resultados mostraram, de forma geral, um aumento na expressão de genes relacionados à osteogênese sobre Ti-Nano em comparação ao Ti-Controle. No entanto, em relação à Rad, não houve diferença entre as superfícies, enquanto a expressão gênica de Mgp foi maior sobre Ti-Nano em comparação ao Ti-Controle apenas nos períodos iniciais da cultura. Além disso, a atividade de ALP in situ, avaliada qualitativamente, foi maior sobre Ti-Nano em comparação ao Ti-Controle. Os resultados permitem 3 concluir que a superfície de titânio com nanotopografia favorece a diferenciação osteoblástica por mecanismos celulares que independem da regulação da expressão das proteínas Rad e MGP

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Data de Publicação

2020-01-28

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